添加reprogramming品牌-沃鎏波洱

　　沃鎏波洱提供的人CD184微珠试剂盒，开发用于从多能干细胞培养物中阳性选择内皮细胞。经修饰的蛋白质被从高尔基体中输送出来，这些包被囊泡从高尔基体中萌芽。高尔基隔离套件提供了一种用于隔离的方法。通过不连续密度梯度从哺乳动物软组织获得高尔基体膜。

　　沃鎏波洱的丙酮酸酶活性检测试剂盒，货号：MAK072，提供了一种简单且直接的检测多种生物样品中丙酮酸激酶活性的方法，适用样本如血液、组织和培养细胞等。丙酮酸的浓度可通过偶联酶促反应来测定，此反应会生成与样品中的丙酮酸含量成正比的比色(570nm)/荧光(λex=535/λem=587nm)产物。一单位丙酮酸激酶的定义为，在25℃条件下每分钟将一个磷酸基团从PEP转移到ADP生成1μmol丙酮酸所需的酶量。

　　添加reprogramming品牌-沃鎏波洱小鼠心脏祖细胞分离试剂盒组分

　　1mL CD31-生物素：生物素结合的抗CD31单***小鼠抗体。沃鎏波洱提供的细菌蛋白提取试剂盒兼容基于FLAG?、HIS-Select?和谷胱甘肽S-转移酶的色谱蛋白纯化系统。

　　2mL抗生物素微珠：与单***抗生物素抗体结合的微珠。沃鎏波洱提供的酵母线粒体分离试剂盒能够快速和容易地裂解酵母细胞壁，并从酵母细胞中分离富集的线微球，小鼠：与单***抗Sca-1抗体结合的微珠。高尔基体由一系列扁平的膜泡组成。扁平水池的堆叠有三个确定的区域，称为顺、中、跨高尔基体。

　　产品形式所有成分在含有稳定剂和0.05%叠氮化钠的缓冲液中提供。高效-在我们的ZeroBluntTOPO载体上面的-致死ccdB基因效用作为阳性选择方法，因此只有具有插入片段的***才会在您的平板上生长成菌落。

　　2-8℃保存，避免光线照射。不要冷冻。瓶标签上注明有效期。酵母蛋白提取试剂盒用干冰装运。DTT溶液、蛋白酶抑制剂鸡尾酒和裂解酶应储存在-20℃下。在DTT溶液第一次解冻后，建议将该溶液分装，在-20℃下保存。

　　Sca-1+/CD31-细胞的分离分两步进行。首先，用CD31-生物素作为主要标记试剂，用与MicroBeads结合的抗生物素单***抗体作为次要标记试剂，间接磁标记CD31+细胞。标记的细胞随后通过MACS柱上的分离而耗尽，该柱放置在MACS分离器的磁场中。

　　沃鎏波洱冰袋配送丙酮酸激酶活性检测试剂盒，收到后储存于-20℃，建议避光。丙酮酸激酶活性检测试剂盒准备说明：在打开之前简单地离心机小瓶。使用超纯水制备试剂。为了保持试剂的完整性，避免重复冻融循环。丙酮酸激酶测定缓冲液-让缓冲液在使用前达到室温。荧光过氧化物酶底物-允许试剂在使用前达到室温。用移液管充分混合，然后取样，在-20℃下储存，防止受光和水分影响。解冻后，荧光过氧化物酶底物即可用于比色分析。

　　在第二步中，用抗Sca-1微珠标记Sca-1+细胞，并通过在MACS柱上的分离从预富集的CD31-细胞部分中通过正选择进行分离，MACS柱放置在MACS分离器的磁场中。从磁场中除去柱后，磁保留的Sca-1+/CD31-细胞可以被洗脱作为阳性选择的细胞部分

　　在显微镜荧光素长波光滤光片下观察（荧光素和罗丹明）。在健康细胞中，线粒体将线粒体内DePsipherTM聚集后呈红色。红色聚集体的最大发射波长为590nm。在垂死的细胞中或具有破坏电位的细胞，染料将保持其单体形式在细胞质呈绿色，最大发射波长为530nm。沃鎏波洱提供的DePsipher?线粒体膜电位检测试剂盒DePsipherTM可用于快速评估细胞群体的生存能力评估药物或其他细胞毒素对细胞群的影响，并检测已知模型中的早期凋亡。

　　添加reprogramming品牌-沃鎏波洱根据干细胞抗原-1(Sca-1)的表达，从成年心肌中鉴定出一批心肌祖细胞。_这些细胞表达大多数心源性转录因子，但缺乏心脏结构基因的表达。5-氮胞苷处理后在体外诱导Sca-1+细胞分化。此外，这些人群在缺血/再灌注时移植到受损心肌。

　　从微量滴定板中取出所需的条数。剩下的应在箔袋中重新密封并存放在2-8°C。用洗涤缓冲液冲洗微孔板3次，每次300ul。倒置在吸收毛巾，并轻轻拍打以除去所有孔内的剩余的洗涤液。注意，在进行下一实验步骤前，要保持孔内湿润不干燥。在每个空白和样品孔中加入10μL的测定缓冲液。待测样品为血清或血浆时，在空白处加入10μL基质溶液。标准和控制威尔斯（选项A）。如果样品没有显著的血清基质成分，添加10μL测定缓冲液代替（选项B）。

　　小鼠心肌分化融合模型。成年小鼠心脏中的大多数Sca-1+细胞共同表达内皮标记物CD31。_研究表明只有CD31-而不是CD31+细胞群具有心肌分化功能。_总之，Sca-1+/CD31-细胞代表一个独特的心脏祖细胞群体，能够分化为成熟的心肌细胞。

　　MMP-14抑制剂筛选试剂盒的操作步骤：MMP-14溶液制备：在使用前用MMP-14缓冲液以1:50稀释MMP-14酶。尽可能地做多一点用来满足待测化合物的数量、酶控制和必要的溶剂控制（S）。将50μl稀释的MMP-14酶加入待测孔（S）。在背景控制（BC）中加入50μL的MMP-14测定缓冲液。在存在MMP-14特异性抑制剂的情况下，底物的裂解减少/消除，导致减少或总损失。MCA荧光。

　　●缓冲液：用autoMACS冲洗液稀释MACS BSA原液(#)1:20，制备含有磷酸盐缓冲盐水(PBS)、pH 7.2、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mM EDTA的溶液。(#)。保持缓冲液冷却（2～8℃）。使用前脱气缓冲，因为气泡会阻塞塔。此外，该酵母线粒体分离试剂盒包括用于蛋白质组研究中使用的线粒体蛋白质分析的提取缓冲液和用于完整线粒体的存储缓冲液。

　　●MACS列和MACS分离器：可以在LS列上执行CD31+细胞的耗尽。随后对Sca-1+细胞的阳性选择可以在MS柱上进行。也可以通过使用autoMACS Pro或autoMACS Separator执行正选择和耗尽。

　　●(可选的)用于流式细胞术分析的荧光铬结合抗体，例如，抗生物素-FITC()、抗Sca-1-APC()或CD31-PE()。

　　●（可选的）碘化丙烷溶液（#）或7-AAD，用于流式细胞仪排除死细胞。沃鎏波洱提供的高尔基体分离试剂盒提供了一种通过不连续密度梯度分离法从哺乳动物软组织中分离高尔基膜的方法。通过测定UDP-半乳糖转移酶的活性，或者采用适当的抗体免疫检测B-COP或GM130等高尔基体特异性标志物蛋白，来测定高尔基体的富集程度（货号：分别为G6160和G7295）。其他细胞器的分离可采用Sigma提供的相应标志物检测试剂盒检测（货号：CS0780、CYTOCOX1、CY0100和CAT100）。

　　●（可选）用于耗尽死细胞的死细胞去除试剂盒（#）。完整的叶绿体是研究诸如碳同化、电子流动和磷酸化、代谢运输或蛋白质靶向等叶绿体过程的最佳起始材料。

　　●（可选的）预分离过滤器，30埃米（#）以去除细胞块。叶绿体分离方法包括机械细胞壁和膜破裂、通过过滤去除细胞碎片和未破碎的叶组织、通过离心收集总细胞叶绿体、以及使用Percoll_层或梯度从破碎的叶绿体中分离完整叶绿体。

　　细胞毒性检测试剂盒（货号：L3224）LIVE/DEAD?Viability/比台盼蓝排除试验(一种常用的检测死亡细胞的方法)更灵敏。经济有效细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD?Viability/具有高度灵敏性，因为荧光染料作用于活细胞(钙黄绿素-AM)或死细胞(乙锭二聚体-1)，从而明亮的荧光。同时背景光很弱，因为荧光染料在作用于细胞之前几乎不发荧光。

　　CD184也被称为CXCR4或fusin，是一种45kDa的7种跨膜G蛋白连接的SDF-1趋化因子受体。CD184在Sox17+/FoxA2+终末内胚层（DE）细胞上表达，该细胞可来源于体外的多能干细胞（PSC）。高剂量激活素A联合Wnt和FGF途径激活可诱导DE分化。诱导后3～5天，用CD184可分离DE细胞。

　　沃鎏波洱的丙酮酸酶活性检测试剂盒，货号：MAK072，提供了一种简单且直接的检测多种生物样品中丙酮酸激酶活性的方法，适用样本如血液、组织和培养细胞等。丙酮酸的浓度可通过偶联酶促反应来测定，此反应会生成与样品中的丙酮酸含量成正比的比色(570nm)/荧光(λex=535/λem=587nm)产物。一单位丙酮酸激酶的定义为，在25℃条件下每分钟将一个磷酸基团从PEP转移到ADP生成1μmol丙酮酸所需的酶量。

　　单***CD184（CXCR4）抗体结合APC（同型：小鼠IgG2a）。经修饰的蛋白质被从高尔基体中输送出来，这些包被囊泡从高尔基体中萌芽。高尔基隔离套件提供了一种用于隔离的方法。通过不连续密度梯度从哺乳动物软组织获得高尔基体膜。

　　结合单***小鼠抗APC抗体的微珠(同型：小鼠IgG1)。通过测量荧光染料JC-1对线粒体的摄取量(编号CS0760)来检测内线粒体膜。该试剂盒包含酵母细胞壁裂解酶(球体形成)裂解所需的所有试剂，接着是细胞膜裂解/破坏和线粒体分离。

　　细胞毒性检测试剂盒（货号：L3224）LIVE/DEAD?Viability/比台盼蓝排除试验(一种常用的检测死亡细胞的方法)更灵敏。经济有效细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD?Viability/具有高度灵敏性，因为荧光染料作用于活细胞(钙黄绿素-AM)或死细胞(乙锭二聚体-1)，从而明亮的荧光。同时背景光很弱，因为荧光染料在作用于细胞之前几乎不发荧光。

　　首先，用CD184（CXCR4）抗体和抗APC微珠间接磁标记CD184（CXCR4）+细胞。然后，将电池悬浮液加载到MACS柱上，该柱放置在MACS分离器的磁场中。可以使用适当的标记物检测试剂盒测量与其他细胞器的分离（参见用于测量酶活性的附加试剂盒）。

　　磁标记的CD184(CXCR4)+细胞保留在柱内。未标记的细胞穿过，这个细胞部分因此耗尽CD184(CXCR4)细胞。从磁场中除去柱后，磁保留的CD184(CXCR4)+细胞可以被洗脱作为正选择的细胞部分。作为真核细胞能产生能量的地点，线粒体的特征是双层膜结构：外膜和折叠的内膜。分离所得的线粒体可用作进行体外研究的工具，如呼吸和能量生成研究，凋亡、mtDNA和mtRNA、以及线粒体蛋白谱分析。

　　沃鎏波洱提供的小鼠NGALELISA试剂盒（KIT042），用于体外定量测定小鼠尿、血浆、血清、组织提取物或培养基中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白--NGAL含量。沃鎏波洱提供的小鼠NGALELISA试剂盒（KIT042）所有组分均储存在4℃，所有孵育均在室温下进行。该试剂盒包含试剂和预涂覆的96孔板，这大大减少了操作时间。简单的步骤，高度的重复性，总的测定时间在4小时以内。

　　●PB缓冲液：Dulbecco磷酸盐缓冲盐水（DPBS），不含Ca＋，Mg~+和0.5%牛血清白蛋白（BSA）。保持缓冲液冷却（2～8℃）。使用前脱气缓冲，因为气泡会阻塞塔。这一款高尔基体分离试剂盒采用大鼠肝脏样本进行了优化，并在大鼠肾脏、脾脏和心脏上进行过测试。

　　●PEB缓冲液：通过将MACS BSA原液()1:20与autoMACS冲洗液()稀释，制备含有磷酸盐缓冲盐水(PBS)、pH 7.2、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mM EDTA的溶液。保持缓冲液冷却（2～8℃）。使用之前的脱气，因为气泡可以阻塞柱。通过使用拓扑异构酶活化的全新线-TOPO?载体，只需在实验台上花费5分钟时间即可获得更高的***效率。

　　_注：EDTA可由其他补充剂代替，如抗凝剂柠檬酸葡萄糖公式-A（ACD-A）或柠檬酸磷酸葡萄糖（CPD）。BSA可被其他蛋白替代，如人血清白蛋白、人血清或胎牛血清。不建议使用含有Ca2+或Mg2+的缓冲区或介质。多种原因会给长片段***带来难题，这其中就包括传统分子生物学试剂自身的局限。Invitrogen?TOPO?XL-2完整PCR***试剂盒提供了克服这些限制的所有必要元素，并且能够精确，有效和简单地***高达13kb的长PCR产物。

　　●MACS柱和MACS分离器：为了获得最佳的纯度和回收率，强烈建议使用LS柱。也可以通过使用autoMACS Pro或autoMACS Separator执行正选择。

　　●（可选的）碘化丙烷溶液（#）或7-AAD，用于流式细胞仪排除死细胞。沃鎏波洱提供的PureLink核酸纯化试剂盒是一个核酸纯化系统家族，设计用于满足各种特定核酸类型、样本来源、体积、通量水平以及下游应用的挑战。

　　●（可选）预分离过滤器（#）以去除细胞块。每一种试剂均可从细胞样本制备出总蛋白提取物。除了传统试剂外，该试剂盒中还含有最新的除垢试剂。

　　沃鎏波洱提供的BioAssaySystems品牌的EnzyChromTMNAD+/NADH分析试剂盒基于乳酸脱氢酶循环反应，其中形成的NADH还原甲醛（MTT）试剂。在565nm处测得的还原产物颜色的强度与样品中的NAD+/NADH浓度成正比。该方法对NAD+/NADH具有高度特异性，NADP+/NADPH干扰最小（＜1%）。我们的测定是一种方便的方法来测量NAD，NADH及其比例。